美国Waters ACQUITY 二维 超高效液相色谱仪

发布:2016-09-11 22:30 | 来源:未知 | 浏览:

二维UPLC/UHPLC分离技术

UPLC®技术的分离度、灵敏度和高通量优势在二维应用中尤其 重要。沃特世公司为ACQUITY UPLC、ACQUITY UPLC H-Class和ACQUITY UPLC H-Class Bio系统构建的2D技术方案,是从管道到软件再到阀控制的专门设计,可为各种应用提供持续一致、可重现的结果。

  • 1 方便使用的配置,故障率低,可使您快速而成功获得2D UPLC实验,更加自信从容。
  • 2 ACQUITY UPLC系统和经验证的色谱柱,为您提供业界最好的分离性能和灵敏度。
ACQUITY UPLC 2D LC

全面的二维技术——扩大应用范围。

传统的2D-LC使用的是离子交换(IEX)和反相(RP)色谱。所有IEX方法都要使用含盐的缓冲剂,如果缓冲剂进入了质谱仪 (MS),可能会引起电离背景和污染问题。由于IEX分离仅基于肽类的电荷,IEX维度常常导致较差的色谱分离度,这时肽类会以多种馏分的形式出现,使数 据解析变得非常困难。

这一改进的2D方法在第一维度使用pH为10的RP,然后在第二维度使用pH为2的RP,得到了远远好于传统IEX方法的结果。

一流的重现性确保准确的鉴定结果

通过2D-LC分离获得了越来越多的准确鉴定结果。我们可以看到更多基于2D-LC的可重现蛋白质鉴定。

2D

 


在两个维度都达到更高分离度。

当第一维度使用离子交换作为分离方法时,可能会导致分离度较差和 馏分间的流失。在第一步使用高分离度技术支持,可确保在最后一步为您提供更丰富的信息。在pH为10的条件下使用反相色谱,接着在较低pH条件下利用亚2 μm颗粒技术进行分离,可获得有用的正交分离结果,并生成高质量的数据。

更高的分离度意味着更出色的蛋白质鉴定结果。

在此分离中,通过分析大肠杆菌的胰蛋白酶消化物证实了2D-LC分离复杂蛋白质组学样品的能力。通过在一个维度中使用ACQUITY® UPLC M-Class,在色谱柱上加载0.5 µg样品进行分离,从而在2874种肽中鉴定出365种蛋白质。添加2.5 μg样品至2D-LC系统,分别通过5步和10步分离鉴定出7661种和9415种肽。

2D-LC可实现:

  • 1 在更加准确的基础上鉴定出两倍于传统方法的蛋白质
  • 2 增加多肽回收率
  • 3 更可靠的检测结果和更高的蛋白质覆盖率